第一節(jié) 產(chǎn)品定義、性能及應(yīng)用特點(diǎn)
一、產(chǎn)品定義
酵母硒是通過(guò)酵母（一般是啤酒酵母）在生長(zhǎng)過(guò)程中對(duì)硒元素的自主吸收和轉(zhuǎn)化而形成的有機(jī)硒的化合物。它除了本身具備無(wú)機(jī)硒的各項(xiàng)功效外，更增添了酵母的效用和營(yíng)養(yǎng)（助消化，富含蛋白質(zhì)、氨基酸、多種維生素與礦物質(zhì)）。
二、性能
硒是人和動(dòng)物體內(nèi)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH—P)的要素，GSH—P廣泛存在于生命機(jī)體的肝、腎、心、肺等，硒代半胱氨酸為該酶提供其活性中心的必需基因，GSH一利用谷胱甘肽使有毒性的過(guò)氧化物還原為無(wú)害的羥基化臺(tái)物，使過(guò)氧化物分解，清除活性自由基部位，保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能，修復(fù)分子損傷。
硒能清除機(jī)體內(nèi)重金屬的積累，具有解除重金屬中毒的能力，是部分重金屬元素天然的解毒劑。硒能影響肝血紅素代謝，并能明顯抑制由硫化物或硫基化合物所引起的線粒體腫脹現(xiàn)象。
三、應(yīng)用特點(diǎn)
硒是人體必需的微量元素，適量攝入硒能夠提高體內(nèi)硒水平，使體內(nèi)谷胱甘肽過(guò)氧化酶(GSH-PX)活性增加。硒缺乏可影響人體抗氧化功能與免疫功能，并引起克山病。硒酵母富含B族維生素。
1、硒的清除自由基及抗氧化作用。
硒在GSH-PX的活性中心，是GSH-PX的輔助因子，能催化過(guò)氧化氫和有機(jī)氫過(guò)氧化物的還原。用硒酵母治療冠心病可使血漿過(guò)氧化脂質(zhì)(LPO)均值下降，GSH-PX比值升高，硒可通過(guò)直接或間接的抗氧化作用，減少或阻止脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，降低體內(nèi)LPO濃度，升高前列環(huán)素PGI2的含量，使PGI1/TXA1(血栓素A2)比值升高，防止血栓形成。Se-GSH-PX活性增高能大量清除在血管壁損傷處凝聚的膽固醇，調(diào)節(jié)血脂代謝，從而防止動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展。
硒的抗氧化作用還能調(diào)整細(xì)胞代謝逆轉(zhuǎn)惡性細(xì)胞的功能，微粒體環(huán)氧化酶或羥化酶能活化絕大多數(shù)致癌物，生成活性環(huán)氧化物和羥化產(chǎn)物而致癌。含硒酶GSH-PX能破壞體內(nèi)的一些環(huán)氧化物造成環(huán)氧化活化途徑的堵塞，改變致癌物的代謝方向，從而減少甚至消除致癌危險(xiǎn)。
硒在抗衰老作用方面，目前認(rèn)為其主要作用機(jī)制是硒化物參與Se-GSH-PX而發(fā)揮抗氧化的作用和硒本身就是自由基清除劑。硒可清除體內(nèi)代謝所產(chǎn)生的自由基粒子，該自由基粒子在癌變過(guò)程中起重要作用，同時(shí)保護(hù)細(xì)胞膜及內(nèi)容物免受損傷。
2、硒能提高機(jī)體免疫力
用不同種類的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)充硒能使血中免疫球蛋白水平增高或維持正常，還證明硒能增強(qiáng)動(dòng)物對(duì)疫苗或其它抗原產(chǎn)生抗體的能力，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用。
對(duì)30例化療癌患者加服硒制劑前后的免疫功能進(jìn)行了測(cè)定，并與單純化療組進(jìn)行了比較，結(jié)果表明適量的硒有提高中、晚期癌患者細(xì)胞免疫力的作用，可減輕化療的副作用，預(yù)防血細(xì)胞減少，有助于化療的順利進(jìn)行。
3、對(duì)DNA的作用
硒可抑制程序外DNA的修復(fù)，能抑制腫瘤細(xì)胞的DNA合成，硒通過(guò)先擇性地抑制肝癌細(xì)胞的環(huán)-磷腺苷-磷酸-酯酶(C-AMP-PDZ)的活性，提高肝癌細(xì)胞內(nèi)C-AMP水平，從而造成了控制癌細(xì)胞分裂及增殖的內(nèi)環(huán)境而發(fā)揮抑癌作用。
第二節(jié) 發(fā)展歷程
酵母是一種可食用的、營(yíng)養(yǎng)豐富的單細(xì)胞微生物，它與人類日常生活和工業(yè)應(yīng)用有著廣泛密切的聯(lián)系；酵母也是人類利用最早、應(yīng)用范圍最廣、當(dāng)前人類直接食用量最多（以百萬(wàn)噸計(jì)）的一種微生物。
活性酵母則是指以糧食、糖類等為原料，利用生物工程技術(shù)培養(yǎng)得到的、具有發(fā)酵活性的純微生物制品。
早在五千多年前，人類就開(kāi)始利用酵母來(lái)制作發(fā)酵產(chǎn)品。從最初利用啤酒酵母泥作為商品在市場(chǎng)上銷售至今，酵母生產(chǎn)已經(jīng)有了二百多年的歷程，而且在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)和畜牧業(yè)中已得到了長(zhǎng)期而廣泛的應(yīng)用。
酵母是一種單細(xì)胞生物，有著天然豐富的營(yíng)養(yǎng)體系。酵母細(xì)胞中含有大量的有機(jī)物、礦物質(zhì)和水分。有機(jī)物占細(xì)胞干重的90％—94％，其中蛋白質(zhì)的含量占細(xì)胞干重的35％—60％，碳水化合物的含量在35％—60％，脂類物質(zhì)的含量在1％—5％。酵母細(xì)胞中還富含多種維生素、礦物質(zhì)和多種酶類，能促進(jìn)其被消化吸收。此外它還含有多種鮮為人知的活性物質(zhì)，如麥角固醇、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、輔酶A等。
酵母中富含多種礦物質(zhì)和微量元素，如鈣、鐵、鋅、鎂、硒、鉻、錳等，這類營(yíng)養(yǎng)素以生命結(jié)合態(tài)形式存在，不僅天然、安全，也易消化吸收，并具有高生物利用度。硒是人體必需的微量元素之一，能抗衰老，抗腫瘤，預(yù)防動(dòng)脈硬化，防止克山病、大骨節(jié)病，解毒，提高肌體免疫力，是目前所知惟一與抗病毒突變有關(guān)的微量元素。我國(guó)存在一條東北至西南走向的低硒地帶，約一億人口低硒或缺硒。
鉻也是人體必需的微量元素之一，研究表明，人和動(dòng)物在應(yīng)激的情況下，對(duì)鉻的需要量增加，缺鉻則導(dǎo)致體重下降、外周神經(jīng)炎、血漿對(duì)葡萄糖的清除受損等。而酵母硒、酵母鉻是優(yōu)質(zhì)的硒、鉻營(yíng)養(yǎng)源。略……
第三節(jié) 我國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)展環(huán)境分析
2010年，中國(guó)經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)的內(nèi)在動(dòng)力依然較強(qiáng)，經(jīng)濟(jì)仍具備實(shí)現(xiàn)平穩(wěn)快速增長(zhǎng)的有利條件。但也應(yīng)看到，經(jīng)濟(jì)運(yùn)行仍然面臨許多困難因素，一些長(zhǎng)期性的矛盾和問(wèn)題還需要通過(guò)深層次的改革和調(diào)整來(lái)加以解決。
一、外部條件分析
2010年我國(guó)經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)的外部環(huán)境有所改善，但外部需求恢復(fù)增長(zhǎng)需要較長(zhǎng)時(shí)期。在各國(guó)開(kāi)出的“強(qiáng)力藥方”作用下,全球經(jīng)濟(jì)出現(xiàn)大病初愈跡象。美國(guó)經(jīng)濟(jì)在經(jīng)歷了前幾個(gè)季度的衰退后初露增長(zhǎng)曙光。世界各大主要經(jīng)濟(jì)體均出現(xiàn)不同程度增長(zhǎng)。美、歐、日等主要經(jīng)濟(jì)體開(kāi)始出現(xiàn)復(fù)蘇跡象，但目前仍面臨失業(yè)率飆升、財(cái)政赤字劇增和消費(fèi)不振等諸多挑戰(zhàn)，經(jīng)濟(jì)刺激計(jì)劃也將收縮或陸續(xù)退出，經(jīng)濟(jì)全面復(fù)蘇將是一個(gè)曲折而漫長(zhǎng)的過(guò)程。
二、內(nèi)部條件分析
1、國(guó)內(nèi)消費(fèi)市場(chǎng)拓展空間廣闊，但難度增大
國(guó)內(nèi)消費(fèi)市場(chǎng)仍有很大的潛力：首先，農(nóng)村消費(fèi)市場(chǎng)將會(huì)迅速啟動(dòng)并形成新的經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)點(diǎn)。其次，城鎮(zhèn)居民收入和消費(fèi)信心增加，有利于刺激本輪消費(fèi)升級(jí)。但是，在當(dāng)前就業(yè)形勢(shì)嚴(yán)峻、農(nóng)民增收困難情況下，同時(shí)受未來(lái)支出和消費(fèi)習(xí)慣等多重因素制約，我國(guó)消費(fèi)增長(zhǎng)難以持續(xù)保持在一個(gè)較高的水平上。
2、國(guó)內(nèi)投資增長(zhǎng)具備潛力，但民間投資意愿不強(qiáng)
我國(guó)的國(guó)內(nèi)投資增長(zhǎng)具備一定的潛力，主要表現(xiàn)在：就業(yè)壓力和改善現(xiàn)狀的迫切愿望，形成了高漲的投資熱情；房地產(chǎn)、汽車工業(yè)發(fā)展帶來(lái)的產(chǎn)業(yè)規(guī)模擴(kuò)大以及工業(yè)化、城市化進(jìn)程加快等變化，為投資提供了廣闊空間；巨大的國(guó)民總儲(chǔ)蓄和國(guó)外投資，為投資提供了充足的資金支持。但目前經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)動(dòng)力主要還是依靠投資拉動(dòng)，政府投資增速比民間投資增速要快得多。實(shí)現(xiàn)經(jīng)濟(jì)明顯復(fù)蘇的關(guān)鍵還是要帶動(dòng)民間的投資。
3、穩(wěn)定出口政策成效明顯，但外貿(mào)形勢(shì)不容樂(lè)觀
首先，近期人民幣升值壓力有所上升，美元出現(xiàn)較大幅度貶值。美元中長(zhǎng)期弱勢(shì)格局難以根本改變，而中國(guó)擁有世界第一的外匯儲(chǔ)備和巨大的貿(mào)易順差，人民幣升值壓力近期有所上升，不利于中國(guó)出口回升。其次，國(guó)際貿(mào)易摩擦加劇。國(guó)際貿(mào)易保護(hù)主義升溫，中國(guó)成為最大的受害國(guó)。中國(guó)未來(lái)要想重現(xiàn)出口20%、30%及以上的持續(xù)高速增長(zhǎng)局面已不太現(xiàn)實(shí)。
4、工業(yè)增長(zhǎng)條件充足，但結(jié)構(gòu)調(diào)整難度很大
一方面，工業(yè)經(jīng)濟(jì)增速發(fā)展條件充足：工業(yè)企業(yè)利潤(rùn)的增長(zhǎng)慣性依然存在；公司治理和管理水平的改善；消費(fèi)升級(jí)步伐的不斷加快，投資較快增長(zhǎng)的態(tài)勢(shì)將增大對(duì)制造業(yè)產(chǎn)品的需求。另一方面，工業(yè)快速增長(zhǎng)的同時(shí)也帶來(lái)了產(chǎn)能過(guò)剩這一中國(guó)經(jīng)濟(jì)的頑疾。前幾年出口的指數(shù)型增長(zhǎng)，吸收了我國(guó)不斷產(chǎn)生的過(guò)剩產(chǎn)能。
5、財(cái)政和金融環(huán)境良好，但通脹預(yù)期逐漸顯現(xiàn)
2010年我國(guó)面臨的財(cái)政和金融環(huán)境相對(duì)比較穩(wěn)定和良好。首先，財(cái)政實(shí)力和外匯儲(chǔ)備實(shí)力逐漸增強(qiáng)。近年來(lái)，中國(guó)財(cái)政收入出現(xiàn)快速增長(zhǎng)趨勢(shì)，財(cái)政實(shí)力不斷增強(qiáng)。其次，我國(guó)的外債償債率，負(fù)債率等各項(xiàng)指標(biāo)均持續(xù)回落。再者，金融監(jiān)管體系在穩(wěn)健提高。但也要看到，2010年全國(guó)通貨膨脹的預(yù)期和壓力，都將逐步增強(qiáng)。
第四節(jié) 產(chǎn)品技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀
目前，在美、英國(guó)，解決硒營(yíng)養(yǎng)不足問(wèn)題是服用硒酵母，這種硒酵母的制造方法，是把酵母放入含有亞硒酸鈉的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
富硒酵母對(duì)于補(bǔ)充因缺硒而引起的一些疾病效果明顯，另外酵母中有很豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，可以發(fā)揮協(xié)同作用。
提供一種高硒含量的富硒酵母及其生產(chǎn)方法。利用現(xiàn)代育種技術(shù)，通過(guò)篩選活動(dòng)對(duì)無(wú)機(jī)硒有耐量的酵母菌種，然后在通過(guò)化學(xué)誘變技術(shù)，選育出硒含量高、生長(zhǎng)速率快、產(chǎn)率高、對(duì)硒的利用率高的耐高硒的富硒酵母菌種。再通過(guò)優(yōu)化的發(fā)酵工藝，獲得高硒含量的富硒酵母產(chǎn)品，硒含量為1000-8000mg／kg。高硒含量的富硒酵母產(chǎn)品分為有活性和沒(méi)有活性的兩種。并針對(duì)這株菌種制訂專門(mén)的生產(chǎn)工藝，生產(chǎn)出高硒含量的富硒酵母產(chǎn)品，硒含量為l000-8000mg／kg。
提供了一種富硒釀酒酵母Zl.2(SaccharomycescerevisiaeHansenZl.2)，其已經(jīng)于2005年10月25日在中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC，武漢大學(xué)，郵編430072)進(jìn)行了生物保藏，保藏編號(hào)為CCTCCM205124。它是通過(guò)亞硝基胍誘變?cè)诤呐囵B(yǎng)基上選育出來(lái)的。
提供了一種富硒酵母產(chǎn)品，其得自上述的富硒釀酒酵母，其中每kg富硒酵母產(chǎn)品中含硒l000-8000mg，其中有機(jī)硒含量占總硒的90-96.9重量％。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，每Kg的富硒酵母產(chǎn)品中含硒1000～3000mg。
在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，富硒酵母產(chǎn)品中有機(jī)硒含量占總硒的93-96.9重量％。
在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，富硒酵母產(chǎn)品的總硒中30-65重量％為硒蛋氨酸。
在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，富硒酵母產(chǎn)品中的活酵母細(xì)胞率是80-95％。
提供了一種生產(chǎn)上述富硒酵母產(chǎn)品的方法，包括下列步驟：
(a)使的富硒釀酒酵母在含硒l0～300μg／ml的培養(yǎng)基中，于26-35℃的溫度下進(jìn)行發(fā)酵；
(b)將酵母發(fā)酵液干燥，即得富硒酵母產(chǎn)品。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述培養(yǎng)基中硒含量為lOOμg／ml。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述的發(fā)酵溫度為30℃。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述的干燥是將酵母發(fā)酵液進(jìn)行噴粉干燥或蒸汽壓力滾筒干燥。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述的干燥是將酵母發(fā)酵液進(jìn)行冷凍干燥。
主要特點(diǎn)有：
(1)使用的耐高硒的富硒酵母菌種耐硒性能穩(wěn)定，生長(zhǎng)速率快，對(duì)硒的利用率高，含硒高可以達(dá)到8000mg／kg，而以前的方法技術(shù)生產(chǎn)的富硒酵母硒含量在1000mg／kg以下，最高才到1600mg／kg。
(2)生產(chǎn)高硒含量的富硒酵母可以有活性，而以前的技術(shù)生產(chǎn)的富硒酵母大多是沒(méi)有活性富硒酵母。
(3)生產(chǎn)的高硒含量的富硒酵母有機(jī)硒含量高，可以達(dá)到99重量％，其中硒蛋氨酸含量可占總硒的65重量％。
具體實(shí)施方式
1)將接種到不同濃度的含硒培養(yǎng)基中，篩選能夠在高硒培養(yǎng)基中能夠生長(zhǎng)的菌種。挑選出耐硒的菌種作為誘變的菌種。
2)將耐硒的菌種接種到含有不同劑量的亞硝基胍的培養(yǎng)基上進(jìn)行誘變。
3)將誘變的酵母菌株再進(jìn)行分離篩選，利用搖瓶和小型發(fā)酵罐進(jìn)行發(fā)酵選出在含有硒的培養(yǎng)基上硒含量高、生長(zhǎng)速率快、產(chǎn)率高、對(duì)硒的利用率高的耐高硒的富硒酵母菌種，即為耐高硒的富硒酵母菌種。
4)篩選培養(yǎng)基配方
麥芽汁培養(yǎng)基含糖量5-25重量％，含硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)量10-300μg／ml，pH值為4～6.5。
5)篩選培養(yǎng)條件
溫度26-35℃，攪拌培養(yǎng)18～48小時(shí)。
提供了一種富硒酵母產(chǎn)品，其得自上述的富硒釀酒酵母，其中每Kg富硒酵母產(chǎn)品中含硒1000～8000mg，優(yōu)選含硒1000-3000mg；其中有機(jī)硒含量占總硒的90-96.9重量％，優(yōu)選占總硒的93-96.9重量％；還優(yōu)選的是，富硒酵母產(chǎn)品的總硒中30-65重量％為硒蛋氨酸，活酵母細(xì)胞率(活酵母細(xì)胞數(shù)目占總細(xì)胞數(shù)目的百分比)經(jīng)平板染色計(jì)算為80-95％。略……
第五節(jié) 產(chǎn)品工藝特點(diǎn)或流程
1)斜面菌種培養(yǎng)：將耐高硒的富硒酵母菌種接種到含糖量為5～25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為l0～300μg／ml、pH值為4～6.5的麥芽汁固體斜面上，在26～35℃培養(yǎng)24-48小時(shí)。
2)一級(jí)液體種子培養(yǎng)：將斜面的酵母菌種接種1～4環(huán)到裝有l(wèi)00～500ml的含糖量為5～25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為10-3001μg／ml、pH值為4～.5的麥芽汁專用培養(yǎng)瓶中，在26-35℃培養(yǎng)24～48小時(shí)。
3)二級(jí)液體種子培養(yǎng)：將一級(jí)液體種子培養(yǎng)液接種到裝有l(wèi)0-40L的含糖(麥芽汁或糖蜜或麥芽汁和糖蜜的混合物)量為5～25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為10-300μg／ml、pH值為4～6.5的卡氏培養(yǎng)瓶中，在26～35℃培養(yǎng)18～48小時(shí)。
4)發(fā)酵罐種子培養(yǎng)：將二級(jí)種子培養(yǎng)液接種到裝有l(wèi)-15m3的含糖(麥芽汁或糖蜜或麥芽汁和糖蜜的混合物)量為5-25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為10～300μg／ml、補(bǔ)充適當(dāng)?shù)牡春土自?、pH值為4～6.5的種子發(fā)酵罐中，在26-35℃培養(yǎng)l8-48小時(shí)。
5)發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)：將發(fā)酵罐種子培養(yǎng)液接種到l5-180m3的含糖(淀粉水解糖或糖蜜或淀粉水解糖和糖蜜的混合物)量為5～25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為10～300μg／ml、補(bǔ)充適當(dāng)?shù)牡春土自础H值為4～6.5的發(fā)酵罐中，所用的營(yíng)養(yǎng)源采用流加方式，硒分批次加入，在26-35℃培養(yǎng)l4-36小時(shí)。
6)分離：采用疊片式分離機(jī)分離，再用真空轉(zhuǎn)鼓過(guò)濾或者用板框壓濾。
7)干燥：采用60-140℃沸騰式干燥，干燥的產(chǎn)品具有活性；采用l00～180℃噴粉干燥或者用3-6Kpa的蒸汽壓力滾筒干燥，干燥產(chǎn)品沒(méi)有活性是粉狀或小片狀；也可以采用冷凍干燥法干燥。
8)包裝：可以采用多種形式的包裝成為高硒含量的富硒酵母產(chǎn)品。在發(fā)酵罐種子培養(yǎng)和發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)中需要添加適量的氮源和磷源，氮源選自硫酸氨、碳酸氫銨、氨水、磷酸氨、磷酸氫氨和磷酸氫二氨，或是這些物質(zhì)的組合。磷源為選自磷酸、磷酸氨、磷酸氫氨和磷酸氫二氨，或是這些物質(zhì)的組合。
如果是連續(xù)的生產(chǎn)可以增加一級(jí)發(fā)酵罐二級(jí)種子發(fā)酵，發(fā)酵條件是：
將發(fā)酵罐種子培養(yǎng)液接種到15-180m3的含糖(淀粉水解糖或糖蜜或淀粉水解糖和糖蜜的混合物)量為5-25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為10-300μg／ml、補(bǔ)充適當(dāng)?shù)牡春土自?、pH值為4～6.5的二級(jí)種子發(fā)酵罐中，所用的營(yíng)養(yǎng)源采用流加方式，硒分批次加入，在26～35℃培養(yǎng)l4-36小時(shí)。然后進(jìn)行離心機(jī)或板框進(jìn)行分離，在4～10℃儲(chǔ)罐或冷庫(kù)中保存，然后根據(jù)需要接種到發(fā)酵罐中再進(jìn)行下一級(jí)培養(yǎng)。
通過(guò)上述方法即可生產(chǎn)出的富硒酵母產(chǎn)品，其中每kg富硒酵母產(chǎn)品中含硒1000-8000mg，優(yōu)選含硒l000-3000mg；其中有機(jī)硒含量占總硒的90-99重量％，優(yōu)選占總硒的93-99重量％；還優(yōu)選的是，富硒酵母產(chǎn)品的總硒中30—65重量％為硒蛋氨酸，活酵母細(xì)胞率為80-95％。
第六節(jié) 產(chǎn)品技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀
目前，在美、英國(guó)，解決硒營(yíng)養(yǎng)不足問(wèn)題是服用硒酵母，這種硒酵母的制造方法，是把酵母放入含有亞硒酸鈉的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
富硒酵母對(duì)于補(bǔ)充因缺硒而引起的一些疾病效果明顯，另外酵母中有很豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，可以發(fā)揮協(xié)同作用。
提供一種高硒含量的富硒酵母及其生產(chǎn)方法。利用現(xiàn)代育種技術(shù)，通過(guò)篩選活動(dòng)對(duì)無(wú)機(jī)硒有耐量的酵母菌種，然后在通過(guò)化學(xué)誘變技術(shù)，選育出硒含量高、生長(zhǎng)速率快、產(chǎn)率高、對(duì)硒的利用率高的耐高硒的富硒酵母菌種。再通過(guò)優(yōu)化的發(fā)酵工藝，獲得高硒含量的富硒酵母產(chǎn)品，硒含量為1000-8000mg／kg。高硒含量的富硒酵母產(chǎn)品分為有活性和沒(méi)有活性的兩種。并針對(duì)這株菌種制訂專門(mén)的生產(chǎn)工藝，生產(chǎn)出高硒含量的富硒酵母產(chǎn)品，硒含量為l000-8000mg／kg。
提供了一種富硒釀酒酵母Zl.2(SaccharomycescerevisiaeHansenZl.2)，其已經(jīng)于2005年10月25日在中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC，武漢大學(xué)，郵編430072)進(jìn)行了生物保藏，保藏編號(hào)為CCTCCM205124。它是通過(guò)亞硝基胍誘變?cè)诤呐囵B(yǎng)基上選育出來(lái)的。
提供了一種富硒酵母產(chǎn)品，其得自上述的富硒釀酒酵母，其中每kg富硒酵母產(chǎn)品中含硒l000-8000mg，其中有機(jī)硒含量占總硒的90-96.9重量％。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，每Kg的富硒酵母產(chǎn)品中含硒1000～3000mg。
在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，富硒酵母產(chǎn)品中有機(jī)硒含量占總硒的93-96.9重量％。
在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，富硒酵母產(chǎn)品的總硒中30-65重量％為硒蛋氨酸。
在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，富硒酵母產(chǎn)品中的活酵母細(xì)胞率是80-95％。
提供了一種生產(chǎn)上述富硒酵母產(chǎn)品的方法，包括下列步驟：
(a)使的富硒釀酒酵母在含硒l0～300μg／ml的培養(yǎng)基中，于26-35℃的溫度下進(jìn)行發(fā)酵；
(b)將酵母發(fā)酵液干燥，即得富硒酵母產(chǎn)品。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述培養(yǎng)基中硒含量為lOOμg／ml。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述的發(fā)酵溫度為30℃。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述的干燥是將酵母發(fā)酵液進(jìn)行噴粉干燥或蒸汽壓力滾筒干燥。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，其中所述的干燥是將酵母發(fā)酵液進(jìn)行冷凍干燥。
主要特點(diǎn)有：
(1)使用的耐高硒的富硒酵母菌種耐硒性能穩(wěn)定，生長(zhǎng)速率快，對(duì)硒的利用率高，含硒高可以達(dá)到8000mg／kg，而以前的方法技術(shù)生產(chǎn)的富硒酵母硒含量在1000mg／kg以下，最高才到1600mg／kg。
(2)生產(chǎn)高硒含量的富硒酵母可以有活性，而以前的技術(shù)生產(chǎn)的富硒酵母大多是沒(méi)有活性富硒酵母。
(3)生產(chǎn)的高硒含量的富硒酵母有機(jī)硒含量高，可以達(dá)到99重量％，其中硒蛋氨酸含量可占總硒的65重量％。
具體實(shí)施方式
1)將接種到不同濃度的含硒培養(yǎng)基中，篩選能夠在高硒培養(yǎng)基中能夠生長(zhǎng)的菌種。挑選出耐硒的菌種作為誘變的菌種。
2)將耐硒的菌種接種到含有不同劑量的亞硝基胍的培養(yǎng)基上進(jìn)行誘變。
3)將誘變的酵母菌株再進(jìn)行分離篩選，利用搖瓶和小型發(fā)酵罐進(jìn)行發(fā)酵選出在含有硒的培養(yǎng)基上硒含量高、生長(zhǎng)速率快、產(chǎn)率高、對(duì)硒的利用率高的耐高硒的富硒酵母菌種，即為耐高硒的富硒酵母菌種。
4)篩選培養(yǎng)基配方
麥芽汁培養(yǎng)基含糖量5-25重量％，含硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)量10-300μg／ml，pH值為4～6.5。
5)篩選培養(yǎng)條件
溫度26-35℃，攪拌培養(yǎng)18～48小時(shí)。
提供了一種富硒酵母產(chǎn)品，其得自上述的富硒釀酒酵母，其中每Kg富硒酵母產(chǎn)品中含硒1000～8000mg，優(yōu)選含硒1000-3000mg；其中有機(jī)硒含量占總硒的90-96.9重量％，優(yōu)選占總硒的93-96.9重量％；還優(yōu)選的是，富硒酵母產(chǎn)品的總硒中30-65重量％為硒蛋氨酸，活酵母細(xì)胞率(活酵母細(xì)胞數(shù)目占總細(xì)胞數(shù)目的百分比)經(jīng)平板染色計(jì)算為80-95％。略……
第七節(jié) 產(chǎn)品工藝特點(diǎn)或流程
1)斜面菌種培養(yǎng)：將耐高硒的富硒酵母菌種接種到含糖量為5～25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為l0～300μg／ml、pH值為4～6.5的麥芽汁固體斜面上，在26～35℃培養(yǎng)24-48小時(shí)。
2)一級(jí)液體種子培養(yǎng)：將斜面的酵母菌種接種1～4環(huán)到裝有l(wèi)00～500ml的含糖量為5～25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為10-3001μg／ml、pH值為4～.5的麥芽汁專用培養(yǎng)瓶中，在26-35℃培養(yǎng)24～48小時(shí)。
3)二級(jí)液體種子培養(yǎng)：將一級(jí)液體種子培養(yǎng)液接種到裝有l(wèi)0-40L的含糖(麥芽汁或糖蜜或麥芽汁和糖蜜的混合物)量為5～25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為10-300μg／ml、pH值為4～6.5的卡氏培養(yǎng)瓶中，在26～35℃培養(yǎng)18～48小時(shí)。
4)發(fā)酵罐種子培養(yǎng)：將二級(jí)種子培養(yǎng)液接種到裝有l(wèi)-15m3的含糖(麥芽汁或糖蜜或麥芽汁和糖蜜的混合物)量為5-25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為10～300μg／ml、補(bǔ)充適當(dāng)?shù)牡春土自?、pH值為4～6.5的種子發(fā)酵罐中，在26-35℃培養(yǎng)l8-48小時(shí)。
5)發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)：將發(fā)酵罐種子培養(yǎng)液接種到l5-180m3的含糖(淀粉水解糖或糖蜜或淀粉水解糖和糖蜜的混合物)量為5～25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為10～300μg／ml、補(bǔ)充適當(dāng)?shù)牡春土自?、pH值為4～6.5的發(fā)酵罐中，所用的營(yíng)養(yǎng)源采用流加方式，硒分批次加入，在26-35℃培養(yǎng)l4-36小時(shí)。
6)分離：采用疊片式分離機(jī)分離，再用真空轉(zhuǎn)鼓過(guò)濾或者用板框壓濾。
7)干燥：采用60-140℃沸騰式干燥，干燥的產(chǎn)品具有活性；采用l00～180℃噴粉干燥或者用3-6Kpa的蒸汽壓力滾筒干燥，干燥產(chǎn)品沒(méi)有活性是粉狀或小片狀；也可以采用冷凍干燥法干燥。
8)包裝：可以采用多種形式的包裝成為高硒含量的富硒酵母產(chǎn)品。在發(fā)酵罐種子培養(yǎng)和發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)中需要添加適量的氮源和磷源，氮源選自硫酸氨、碳酸氫銨、氨水、磷酸氨、磷酸氫氨和磷酸氫二氨，或是這些物質(zhì)的組合。磷源為選自磷酸、磷酸氨、磷酸氫氨和磷酸氫二氨，或是這些物質(zhì)的組合。
如果是連續(xù)的生產(chǎn)可以增加一級(jí)發(fā)酵罐二級(jí)種子發(fā)酵，發(fā)酵條件是：
將發(fā)酵罐種子培養(yǎng)液接種到15-180m3的含糖(淀粉水解糖或糖蜜或淀粉水解糖和糖蜜的混合物)量為5-25重量％、硒(硒酸鹽或亞硒酸鹽)濃度為10-300μg／ml、補(bǔ)充適當(dāng)?shù)牡春土自?、pH值為4～6.5的二級(jí)種子發(fā)酵罐中，所用的營(yíng)養(yǎng)源采用流加方式，硒分批次加入，在26～35℃培養(yǎng)l4-36小時(shí)。然后進(jìn)行離心機(jī)或板框進(jìn)行分離，在4～10℃儲(chǔ)罐或冷庫(kù)中保存，然后根據(jù)需要接種到發(fā)酵罐中再進(jìn)行下一級(jí)培養(yǎng)。
通過(guò)上述方法即可生產(chǎn)出的富硒酵母產(chǎn)品，其中每kg富硒酵母產(chǎn)品中含硒1000-8000mg，優(yōu)選含硒l000-3000mg；其中有機(jī)硒含量占總硒的90-99重量％，優(yōu)選占總硒的93-99重量％；還優(yōu)選的是，富硒酵母產(chǎn)品的總硒中30—65重量％為硒蛋氨酸，活酵母細(xì)胞率為80-95％。略……
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